Определение группы крови и резус-фактора

Цена: 215 грн.

В корзину -10%

Срок выполнения, дней: 1-2

Код исследования: E29

Антигены системы группы крови Rh закодированы двумя генами: RHD и RHCE. RHD кодифицирует антиген D, в то время как RHCE кодифицирует антигены Cc и Ее. Антиген d используется для отметки отсутствия антигена D. RHD и RHCE кодируют схожие полипептиды, которые на мембране эритроцитов формируют комплекс с гликопротеином, связывающим Rh. Функ¬ция антигенов Rh до конца неизвестна, хотя, учитывая фенотип клеток Rh 0, предполагается, что антигены Rh могут играть структурную роль в мембране эритроцитов.

Структура антигенов Rh предполагает наличие транспортных белков, а гликопротеин, связанный с Rh, может играть определенную роль в транспорте аммиака. Существуют 45 антигенов, которые были отнесены к системе групп крови Rh, среди которых наиболее распространенными и важными являются D, C, с, E и е, но возможно стать аллоиммунными на антигены C, с, E и е при переливании крови и беременности, но они гораздо менее иммуногены, чем D. Менее чем 3% от общего населения, подверженного действию антигенов C, с, E, е становятся аллоимунными, поэтому предтрансфузионное тестирование обычно не проводится на эти антигены. После антигенов, А и В антиген D свидетельствует о самой высокой иммуногенности антигена (в 20 раз выше, чем у большинства других Rh-антигенов). При проведении гемотрансфузии D-положительных эритроцитов почти 80% от D-негативных реципиентов вызывают образование анти-D-антител. К тому же, анти-D иммунизация способствует дальнейшему синтезу антител, по сравнению с другими антигенами в рамках группы крови или за пределами системы Rh. Также антиген D вовлечен в 95% случаев гемолитической болезни новорожденных. Человек считается «резус положительным», если его эритроциты выражены антигеном D, а термин «резус отрицательный» относится к случаю, когда отсутствует антиген D. Отсутствие антигена встречается у 15–17% людей белой расы и реже — у других групп населения. У «белых людей» отсутствие антигена D связано с делецией гена RhD, в то время как у азиатов и афроамериканцев связано с инактивацией генов, а не их делецией. Некоторые эритроциты, несущие D-антиген, требуют длительной инкубации с анти-D реагентом для появления реакции агглютинации. Эти эритроциты считаются положительным D антигеном, и описаны как рецессивный D, ранее известные как Du (менее чем в 1% случаев). Считается, что фенотип рецессивного D гена появляется в ходе одного из трех механизмов:

1) Наследственная передача RHD гена, который кодирует белок D с ослабленной антигенной экспрессией. Более распространена среди чернокожего населения и связана с гаплотипом DCE, а среди белого населения связана с гаплотипами DCе или DсE.

2) Взаимодействие гена D с другими генами. Люди с геном D в транспози¬ции относительно гена С (например, DсE / Се) представляют ослабленную экспрессию гена D.

3) Наследственная передача гена, кодирующего антигенный комплекс D, в котором отсутствуют определенные эпитопы, называется и неполным D. Данные лица могут вырабатывать анти-D в случае их трансфузии с D-положительными эритроцитами. Среди них DVI представляет самое малое количество эпитопов и данные лица представляют самый высокий риск при иммунизации, но менее значимый, чем D-негативные лица. Доноры D-рецес- сивного гена должны считаться Rh(D)-положительными и важно, что они не должны быть определены ошибочно как «Rh негативные», потому что D-слабый антиген может вызвать иммунный ответ, если перелить через кровь Rh-отрицательным лицам. Лица с D-слабым могут быть перелиты с Rh-положительной кровью (исключение — DVI), а беременные не нуждаются в профилактике с анти-D иммуноглобулином. В случае использования соответствующего моноклонального анти-D реактива большинство антигенных детерминантов, включенные прежде как Du, не должны отличаться от D-гена при обычных условиях. Фенотип Rh0 появляется, когда эритроциты не проявляют свойств Rh-антигена минимум двумя возможными механизмами: наследственная передача гена, который кодирует гликопротеин, связывающий анормальный Rh, с нормальными генами RHD и RHCE (или наследственность) определенной мутации гена RHCE связана с отрицательным D геном. Фенотип Rh0 связан структурными аномалиями эритроцитов и гемолизом. Данные лица вырабатывают аллоантитела, взаимодействующие всеми эритроцитами, за исключением Rh0. Анти Rh0 антитела возникают при аллоиммунизации вследствие несовместимых трансфузий Rh-системы или при беременности. Очень редко могут вырабатываться естественные антитела в системе Rh без известных антигенных стимуляторов (анти-Е, анти-С№ ), в большинстве случаев не соответствующих с точки зрения клиники. Также при иммунных гемолитических анемиях аутоантитела часто обладают анти И-активностью. Большинство анти И-антител являются IgG, особенно IgG1 и IgG3 (неполные агглютинины), хотя некоторые могут быть IgM и обычно не активируют комплемент. Агглютинирующие антитела типа IgM являются обычно транзиторными и появляются в начале иммунизации. Наиболее распространенными являются анти-антитела, которые могут провоцировать гемолитическую болезнь новорожденных и тяжелые гемолитические трансфузионные реакции. Их частота значительно снизилась сразу с анти-D профилактикой у Rh-отрицательных беременных с резус-положительным плодом. Анти-C-, C-, E-антитела связаны с гемолитической болезнью новорожденных и легкими гемолитическими трансфузионными реакциями. Типирование резус-фактора эритроцитов производится с помощью анти-D моноклональных сывороток, которые взаимодействуют в соленой среде и содержат как человеческие IgM (которые не являются-категорией Dvi), так и поликлональные IgG-антитела, которые могут быть использованы и в антиглобулиновом тесте на D-рецессивный фактор. При подготовке анти D-сыворотки добавляется человеческий или бычий сывороточный альбумин, который изменяет диэлектрическую константу среды и способствует агглютинации резус-положительных эритроцитов.

Подготовка пациента: Сдача крови натощак.

Материал: Венозная кровь.

Интерферирующие факторы:

Ложноположительные реакции:

1. Эритроциты в виде столбика монет;

2. Полиагглютинация;

3. Гемолитические анемии с тепловыми аутоантителами (наличие антител IgG на поверхности эритроцитов) — повторное определение группы с реаген¬том, из которого удален альбумин, который содержит анти-D агглютинирую¬щие антитела, способные агглютинировать с эритроцитами в солевой сус¬пензии (анти-D солевой).

Ложноотрицательные реакции:

1. Гемолитическая анемия новорожденных (блокировка D-антигенных ситусов материнскими антителами);

2. У лиц с рецессивным Rh D геном возможна слабая и поздняя агглюти¬нация.

Стабильность пробы: образец хранится 48 часов при температуре 2–8 °C.

Метод: Определение группы крови системы АВ0 моноклональными антителами, определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (Цоликлон анти-D Супер),( реакция прямой гемагглютинации).

Тест-системы: набор ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОНЫ Анти-А, Анти-В и Анти-АВ, анти-D Супер), ООО «ГЕМАТОЛОГ» (Москва).

Основные показания к назначению анализа:

1. Перед гемотрансфузией;

2. Перед некоторыми инвазивными или хирургическими процедурами с возможными геморрагическими осложнениями, которые могут потребовать переливания крови;

3. Дородовой и послеродовой иммуногематологический мониторинг мате¬ри и ребенка;

4. Доноры крови.

Интерпретация результатов: полное определение фенотипа Rh назначается донорам крови, его следует учитывать при переливании крови у девочек и женщин в период менопаузы, у больных, постоянно подвергающихся трансфузиям и у реципиентов несоответствующих антиэритроцитарных антител.

• Rh(D)-положительные, если получены результаты, ясно положительные с обеими анти-Dтест-сыворотками, а аутоконтроль — негативный;

• Rh(D)-отрицательны, если получены явно негативные результаты с обеи¬ми анти-D тест-сыворотками, независимо от результатов аутоконтроля.

Дополнительное тестирование является обязательным, если получены слабо положительные результаты или противоречивые результаты с тест-сыворотками, а самоконтроль — негативный, а также и если получены положительные результаты с обеими тест-сыворотками, а аутоконтроль — положительный.

У доноров, в случае если первичный тест на Rh D является отрицательным, необходимо проводить второе тестирование для выявления рецессивного D-фактора (это не является обязательной процедурой для реципиентов крови, которым нужно провести переливание крови с резус-отрицательным фактором). К тому же, определение наличия рецессивного D-фактора у беременных женщин исключает ненужное лечение анти-D иммуноглобулином. Перед тем, как определить пациента как D-рецессивного, необходимо установить факт, что больному не проводилось за последнее время переливание крови с Rh+ эритроцитами.